顯微鏡的放大率和分辨率之間的區別

　　了解熒光成像時(shí)要獲得良好結果時(shí)，了解放大倍率和分辨率之間的區別非常重要。當談?wù)摲糯蟊稊禃r(shí)，我們指的是在顯微鏡下觀(guān)察物體時(shí)會(huì )出現多大的物體。相反，當我們從實(shí)際意義上談?wù)摲直媛蕰r(shí)，我們指的是我們可以在圖像中區分多少細節，這可能是主觀(guān)的。從技術(shù)上講，分辨率受光的折射特性限制。

　　使用熒光可以提高分辨率

　　分辨率和放大率不一樣。在顯微鏡下，我們將放大圖像中可見(jiàn)的細節稱(chēng)為分辨率。如果您看不到放大后的樣本中的細節，則放大或使某些內容看起來(lái)變大不會(huì )有什么好處。明視野顯微鏡依賴(lài)于由于樣品各個(gè)部分之間的密度差異而導致的光吸收差異，就我們的目的而言，這就是細胞。因此，當您想在細胞中看到許多細節時(shí)，明場(chǎng)顯微鏡并不是很好。您如何提高分辨率？加入熒光團以染色樣品中的結構，并過(guò)濾以照亮樣品，聚焦樣品發(fā)出的光，添加靈敏的檢測器，現在您可以進(jìn)行熒光顯微鏡檢查了。

　　熒光成像使用的濾光片的不同類(lèi)型

　　通常情況下，濾光片組被設計成可用于捕獲熒光團的更大激發(fā)和發(fā)射波長(cháng)，但不會(huì )捕獲所有的熒光。多數現代化濾光片組的設計旨在確保激發(fā)濾光片只允許波長(cháng)區間的光線(xiàn)通過(guò)。這種類(lèi)型的濾光片稱(chēng)為帶通濾光片（band-pass filter）。帶通濾光片通常通過(guò)中間波長(cháng)和區間寬度確定。在較為簡(jiǎn)單的熒光顯微鏡裝置中，一旦激發(fā)光線(xiàn)離開(kāi)激發(fā)濾光片，即會(huì )照射到靶標上，靶標上的熒光基團隨即變?yōu)榧ぐl(fā)狀態(tài)，然后發(fā)射向光譜的紅外端（相對于激發(fā)光線(xiàn)）遷移的光線(xiàn)。并非所有此類(lèi)發(fā)射光線(xiàn)都會(huì )被檢測器捕獲到——僅那些允許通過(guò)二向分色鏡且能通過(guò)發(fā)射濾光片的光線(xiàn)。發(fā)射濾光片通常為帶通濾光片或長(cháng)通濾光片，具體取決于特定的熒光團和成像實(shí)驗。如果您希望讓超過(guò)特定波長(cháng)的光線(xiàn)通過(guò)檢測器，可選擇長(cháng)通濾光片.